Karena kecenderungan untuk menghasilkan jumlah positif palsu yang tinggi yang disebabkan oleh kontaminasi pita dengan urutan heterogen, klik tampilan diferensial perlu dikonfirmasi dengan tindakan alternatif untuk menentukan bentuk ekspresi diferensial. Di sisi lain northern blot atau q-PCR sering digunakan untuk mengkonfirmasi hasil, kedua teknik memiliki kekurangan. Northern blot dibatasi oleh keahliannya untuk hanya menyelidiki dengan satu mRNA pada satu waktu, di sisi lain q-PCR membutuhkan transkrip yang cukup panjang untuk menghasilkan primer untuk penggabungan dan probe bisa mahal. Secara meyakinkan, utara terbalik telah digunakan sebagai salah satu cara untuk mengkonfirmasi klik dari DD-PCR, atau urutan dengan bentuk tingkat ekspresi yang diubah. Dalam hal ini, membran akan dilapisi dengan produk DD-PCR yang diperkuat yang telah dikloning menjadi vektor, diurutkan, dan diamplifikasi kembali.
Gambar 250A | northern blot Pembalikan umum northern blot melanjutkan penggunaan cDNA dari sampel penguji dan pustaka SSH. Transkrip yang berlebih dalam sampel penguji akan muncul sebagai titik-titik yang lebih gelap pada membran | Cddouglas2 / Attribution-Share Alike Attribution-Share Alike 4.0 International | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Revn from Wikimedia Commons northern1.jpg) from Wikimedia Commons
Penulis : Milos Pawlowski
Komentar
Posting Komentar