Meganucleases dan Zinc finger nucleases

Meganuklease pertama kali digunakan pada tahun 1988 di sel mamalia. Meganuklease adalah endodeoksiribonuklease yang berfungsi sebagai enzim pembatas dengan situs pengenalan yang panjang, membuatnya lebih spesifik untuk situs tujuan mereka daripada enzim pembatas lainnya. Hal ini meningkatkan spesifisitasnya dan mengurangi toksisitasnya karena tidak akan menyasar banyak situs dalam genom. Meganuklease yang paling banyak dipelajari adalah keluarga LAGLIDADG. Sementara meganuklease masih cukup rentan terhadap pengikatan di luar target, yang membuatnya kurang menarik dibandingkan alat pengeditan gen lainnya, ukurannya yang lebih kecil namun membuatnya menarik secara khusus untuk perspektif vektorisasi virus.

Zinc-finger nucleases (ZFNs), digunakan pertama kali pada tahun 1996, biasanya dibuat melalui fusi domain Zinc-finger dan domain nuklease FokI. Oleh karena itu, ZFN memiliki keterampilan untuk membelah DNA di tempat tujuan. Dengan merekayasa domain jari seng untuk mengarahkan situs tertentu dalam genom, dimungkinkan untuk mengedit penggabungan genom di lokasi yang diinginkan. ZFN memiliki spesifisitas yang lebih besar, namun memiliki potensi untuk mengikat urutan non-spesifik.. Sedangkan sejumlah pembelahan di luar target dapat diterima untuk membuat organisme model transgenik, namun potensinya tidak optimal untuk semua perawatan terapi gen manusia.

Gambar 101A | Pengikatan probe

Gambar 101A | Pengikatan probe "S" ASO ke "S" DNA (atas) atau "A" DNA (bawah). | PaleWhaleGail di Wikipedia bahasa Inggris / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Allele-specific_oligonucleotide_(sample).jpg) dari Wikimedia Commons | URL: Wikimedia Commons.

Penulis : John Kaisermann

Referensi:

Teknik Biologi Molekuler I

Alat Biologi Molekuler I

Komentar