Salah satu teknik dasar biologi molekuler untuk mempelajari layanan protein adalah kloning molekuler. Dalam teknik ini, DNA pengkodean untuk protein yang diinginkan diklon menggunakan reaksi berantai polimerase( PCR), dan / atau enzim pembatas menjadi plasmid (vektor ekspresi). Vektor memiliki 3 ciri khas: asal replikasi, situs kloning ganda( MCS), dan penanda selektif biasanya resistensi antibiotik. Lokasi hulu dari beberapa situs kloning adalah daerah promotor dan situs awal penyalinan yang mengatur bentuk ekspresi gen kloning. Plasmid ini dapat dimasukkan ke dalam sel bakteri atau hewan. Memperkenalkan DNA ke dalam sel bakteri dapat dilakukan dengan transformasi melalui serapan telanjang DNA, conjugation melalui kontak sel-sel atau melalui transduksi melalui vektor virus. Memperkenalkan DNA ke dalam sel eukariotik, seperti yang ditunjukkan oleh sel hewan, secara fisik atau kimiawi disebut transfection. Beberapa teknik transfection transfection yang tidak sama tersedia, seperti yang ditunjukkan oleh kalsium fosfat transfection, elektroporasi, injeksi mikro dan liposom transfection. Plasmid dapat diintegrasikan ke dalam genom, menghasilkan transfection yang stabil, atau mungkin tetap tidak bergantung pada genom, yang disebut transien transfection .
Gambar 095A | Hubungan skematis antara biokimia, genetika dan biologi molekuler | Tidak ada penulis yang dapat dibaca mesin. OldakQuill diasumsikan (berdasarkan klaim hak cipta). (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Schematic_relationship_between_biochemistry,_genetics_and_molecular_biology.svg), "Hubungan skematis antara biokimia, genetika, dan biologi molekuler", https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/ kode legal dari Wikimedia Commons
Penulis : Milos Pawlowski
Komentar
Posting Komentar