Dalam mikroskop fluoresensi, mikroskop pemindaian laser confocal fluoresensi, apalagi seperti dalam biologi molekuler, FRET adalah alat yang berguna untuk mengukur dinamika molekuler dalam biofisika dan biokimia, seperti yang ditunjukkan oleh interaksi protein-protein, interaksi protein-DNA, dan perubahan konformasi protein. Untuk memantau pembentukan complex antara dua molekul, salah satunya diberi label dengan donor dan yang lain diberi label dengan akseptor. The FRET khasiat diukur dan digunakan untuk mengungkapkan interaksi antara kompleks berlabel. Ada beberapa cara untuk mengukur kemanjuran FRET dengan memantau perubahan fluoresensi yang dipancarkan oleh donor atau akseptor.
Emisi sensitif
Satu operasi efikasi pengukuran FRET adalah mengukur variasi intensitas emisi akseptor. Ketika donor dan akseptor berada dalam jarak dekat (1–10 nm) karena interaksi dua molekul, emisi akseptor akan meningkat karena adanya intermolekul FRET dari donor ke akseptor. Untuk memantau perubahan konformasi protein, protein objektif diberi label dengan donor dan akseptor pada dua loci. Ketika putaran atau lengkungan protein membawa perubahan dalam jarak atau orientasi relatif dari donor dan akseptor, perubahan FRET diamati. Jika interaksi molekuler atau perubahan konformasi protein bergantung pada ikatan ligan, ini FRET Teknik ini dapat diterapkan pada indikator fluoresen untuk deteksi ligan.
Gambar 080A | Diagram kartun dari konsep transfer energi resonansi Förster( FRET). | Curtis Neveu (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Concept_of_FRET.png), "Konsep FRET", https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode dari Wikimedia Commons
Penulis : Yavor Mendel
Komentar
Posting Komentar